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快篩試劑的原理

快 篩試劑其實是一種免疫反應與色層分析的檢測方式, 英文稱作immunochromatographic assay,又因為他的反應方式是以液體流動產生反應所以也叫做 lateral-flow assay。在這個檢測裡最重要的元件就是抗體(antibody),抗體的好壞決定了試劑的靈敏度與專一性。我們透過取得待測物的抗原,如COVID-19的鞘蛋白(N-protein),檢測懷孕用的「人絨毛膜促性腺激素」(Human chorionic gonadotropin,簡寫為hCG)等有結構的蛋白質、胜肽鏈或是大分子物質打入動物體內,使其產生抗體,我們再將抗體純化出來,作為試劑的原料。 上一次 我們提到了試劑的結構,這次我們來談談反應的原理: 以驗孕試片(hCG teat)為例,其反應方式如圖所示( 圖片來源 ) 我們需要有幾個抗體:抗hCG一次抗體(圖示上綠色Y,文後稱綠Y)、抗hCG二次抗體(圖示上橙色Y,文後稱橙Y)、抗-抗hCG二次抗體的抗體(很繞口,圖示上紫色Y,文後稱紫Y)。首先要將抗hCG二次抗體與奈米金顆粒(圖示上Au)或是奈米乳膠粒子結合,在這裡奈米金顆粒是作為呈色劑,使反應的條紋呈現紅色。在測試線的位置(Test line)我們固定住抗hCG一次抗體,在控制線的位置(Control line)我們固定住抗-抗hCG二次抗體的抗體。將與奈米金顆粒結合之抗hCG二次抗體放在Gold conjugate pad(圖mix area)。 陽性反應(Positive test): 驗孕用的是人體的尿液,將尿液滴入樣品墊,因為毛細現象的關係樣品會往吸收墊的位置流動。當尿液中含有hCG時會與橙Y結合後往test line移動,hCG會再與綠Y結合,因橙Y上有奈米金顆粒,故在test line會呈現紅色線。有一部份的橙Y沒有跟hCG結合,所以會跑到control line被紫Y抓住,也會呈現紅色線,所以陽性反應會有二條紅線呈現。 陰性反應(Negative test): 沒有懷孕時尿液中不含hCG,所以橙Y不會與test line的綠Y結合,直接往control line流動後被紫Y抓住,在control line呈現紅線,所以陰性反應只有一條紅線呈現。 之後再討論什麼是三明治法與競爭法。
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快篩試劑的構造

快 篩試劑(Rapid test 又叫作 lateral-flow immunoassay) 是一種免疫檢測試劑,利用抗體對抗原的專一性來做檢驗。但由於其組成機構的原因,其不須繁複的操作步驟,且反應速率較快。其常被應用在懷孕檢測、流行病檢測、驗毒品及尿液檢測。 快篩試劑的結構如下: Sample Pad ( 樣品墊 ) 滴入樣品的位置,材料通常是Polyester 或是玻璃纖維。 Gold conjugate pad(膠金墊): 膠體金或Latex與抗體結合後固定的位置,材料通常是Polyester 或是玻璃纖維。 Nitrocellulose membrane: 反應的區域,通常會畫上二條線,一條為Test Line是待測樣品反應的位置;另一條為Control Line是確認反應是否有效的位置。材料為硝化纖維。 Absorbing pad(吸收墊): 為整個移動相反應吸收的地方,會用能吸水的材質如紙、棉花或高分子吸水材料。 下次再與大家分享快篩試劑如何反應。